刘华梅 张鑫 孙家敏

龙岩市科技计划项目联合资金项目(2020LYF17053)；

龙岩市第二医院感染科

目的 探讨微小核糖核酸(microRNA,miR)-130b-3p和Smad4(mothers against decapentaplegic homolog 4)在非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)细胞模型中的表达特征,并阐明2者在脂代谢中的靶向调控机制。方法 应用棕榈酸与肝细胞共孵育24 h,构建NAFLD细胞模型,并分为正常对照组、模型组、miR-130b-3p mimic组及mimic NC组。采用定量逆转录聚合酶链反应(quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,RT-qPCR)法检测各组细胞中miR-130b-3p和Smad4 mRNA的表达水平。将miR-130b-3p模拟物和对照模拟物转染至NAFLD细胞模型中,通过油红O染色检测细胞内脂质蓄积,Western blot法检测细胞内甘油三酯脂酶蛋白和Smad4蛋白的表达。采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-130b-3p与Smad4的靶向关系。结果 模型组甘油三酯脂酶蛋白表达高于正常对照组,miR-130b-3p表达水平、Smad4 mRNA、Smad4蛋白表达水平低于正常对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。miR-130b-3p mimic组的Smad4 mRNA、Smad4蛋白表达及甘油三酯脂酶蛋白表达高于模型组、mimic NC组,差异有统计学意义(P <0.05)。结论 靶向抑制miR-130b-3p下调Smad4表达,能影响体外诱导的非酒精性脂肪性肝病细胞模型脂代谢,有望成为NAFLD的新治疗靶点。

非酒精性脂肪性肝病;miR-130b-3p;Smad4;脂质代谢;棕榈酸;甘油三酯;