包寅秋1 王丽丽1 李丹2 韩成勋2 王平平2 李玲2 芦小单3 张维杰2

2024年度吉林省中医药科技项目（2024123）

1.长春中医药大学临床医学院 2.吉林省人民医院感染病科 3.吉林省人民医院精准分子医学中心

张维杰

目的 基于Tol样受体4(Tol-like receptor 4,TLR4)/核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路探讨百合皂苷对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导的人支气管肺上皮细胞（human bronchopulmonary epithelial cells,BEAS-2B）的影响。方法 于2024年10月—2025年2月在吉林省人民医院精准分子医学中心通过培养、传代正常BEAS-2B细胞，以及通过LPS构建肺部炎症损伤模型，采用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)方法测定细胞存活率，实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应（real-time quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,RT-qPCR）检测NF-κB等基因m RNA的表达，Western blotting法检测NF-κB等相关蛋白表达。结果 CCK8法检测结果显示，不同浓度的LPS处理BEAS-2B细胞后，随着LPS浓度的增加，存活细胞的数量逐渐减少，当LPS浓度为0、25%、40%、55%、70%、85%时，吸光度（optical density,OD）值分别为（0.88±0.02）(0.87±0.01)(0.73±0.01)(0.51±0.03)(0.42±0.01)(0.25±0.02)。而在不改变LPS浓度的情况下用百合皂苷处理后结果显示存活细胞的数量较前增多，OD值分别升高至（0.90±0.02）(0.88±0.03)(0.79±0.02)(0.67±0.02)(0.48±0.04)(0.40±0.02)。RT-qPCR法检测结果显示，实验组1（百合皂苷浓度60%）NF-κB基因表达量为（0.46±0.03），低于对照组的（1.00±0.05），差异有统计学意义（P<0.05），实验组2（百合皂苷浓度90%）NF-κB基因表达量为（0.72±0.04），低于对照组的（1.00±0.05），差异有统计学意义（P<0.001）。Western blotting法检测结果显示，实验组1和实验组2目标蛋白NF-κB表达水平随着百合皂苷增高而降低。结论 百合皂苷可能通过调控TLR4/NF-κB信号通路改善LPS诱导的BEAS-2B细胞的损伤。

核因子-κB信号通路;Toll样受体4;百合皂苷;人支气管肺上皮细胞;肺部炎症模型;脂多糖;